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微滴式数字PCR技术应用 食品中致病菌检测最新标准汇总

2022-06-22
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  【化工仪器网 标准发布】食品安全问题不仅损害消费者的权益,还会危害消费者的健康。被细菌、病毒、寄生虫获化学物质污染的食物进入人体后可能会引发食源性疾病,导致急性中毒、传染病感染或者癌症等长期疾病。据世界卫生组织估计,每年全世界有6亿人(几乎每10人中就有1人)因食用受污染的食品而患病,并有42万人死亡。食源性疾病也是我国最大的食品安全问题,除了给医疗卫生系统带来压力之外,还可能造成较为严重的经济损失。
 

  细菌、病毒等微生物因素是食源性疾病主要致病因素之一,因此微生物检测是预防控制食源性疾病,保障食品安全的关键因素。针对食品微生物检测,我国制订了一系列食品安全国家标准以及有关行业标准等,如GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》、SN/T 0330-2012《出口食品微生物学检验通则》。近期,又有一批新的食品微生物检测标准实施,均为出口食品中致病菌检测方法,采用的检测方法也均为微滴式数字PCR法。
 

 

  微滴式数字PCR技术是近年来在分子生物学领域获得广泛应用的新型数字PCR技术,具有度灵敏高、绝对定量及高效方便等特点,目前主要应用于微生物检测、转基因检测、疾病检测以及质检领域。
 

  微滴式数字PCR技术在传统的PCR扩增前将一个大的反应体系进行微滴化处理,即利用油包水技术将其分为数万个纳升级的微滴,可以有效避免反应过程中不同引物间、产物间的相互杂交和不同产物之间的竞争抑制,获得较好的扩增效率,也可实现不同模板的同时扩增。与传统PCR、定量PCR相比,其结果的精确度、准确性和灵敏度更佳。
 

  于6月1日正式实施的8项出口食品中致病菌检测方法行业标准共同组成了SN/T 5364-2021《出口食品中致病菌检测方法 微滴式数字PCR法》系列标准,分别为副溶血性弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、产志贺毒素大肠埃希氏菌和克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)的检测提供了规范的微滴式数字PCR检测法。该方法主要用到的设备及耗材包括天平、恒温培养箱、高速台式冷冻离心机、涡旋振荡仪、核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计、ddPCR扩增仪及相关配套设备等。
 

  标准的制定推广了微滴式数字PCR技术的应用,同时也为出口食品的致病菌检测提供了一种更快速有效的方法,为我国食品和农产品的国际贸易提供技术保障。

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